[DNA聚合酶中5 3外切酶活性的作用是什么呢]核酸外切酶就是将核酸序列3'游离端或者5'游离端逐一水解成减少一个核苷酸长度的核酸链和游离的核苷酸区别就是水解的起点端不一样3'→5'核酸外切酶就是从核酸的3'游离羟基端...+阅读
STR分型是什么在DNA鉴定中起什么作用
短串联重复序列,又称为微卫星DNA,重复单位为2-6bp,重复次数10~60多次,基因片段,400bp以下。主要是DNA复制过程中滑动,或复制和修复时滑动链与互补链碱基错配,导致一个或几个重复单位的缺失或插入。对于一个特定的个体,染色体上某个特定位置的重复序列的重复次数是固定的,而对于不同的个体在同一位置处的重复次数可能不同,这就构成了人群中这些重复序列的多态性。由于人类基因组中这种重复序列非常多,通过对这种多态性的检测,就可以明确区分个体与个体的不同,确定父母子的亲缘关系。扩展资料细胞STR分型(cell line STR genotyping)D19S43
3、D5S8
18、D21S
11、D18S5
1、D6S104
3、D3S135
8、D13S3
17、D7S8
20、D16S53
9、CSF1PO、PentaD、vWA、D8S117
9、TPOX、PentaE、TH0
1、D12S39
1、D2S1338和FGA等19个具有高度多态性基因座和一个性别基因位点Amelogenin对人源细胞进行STR分型检测。根据STR分型结果对细胞的生长状态(是否存在交叉污染)和细胞的株系进行确认的技术手段。参考资料来源:百科-短串联重复序列参考资料来源:百科-STR分型检测参考资料来源:百科-细胞STR分型...
怎么利用str分型技术进行个体识别
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亲子鉴定知识
通过DNA检测分析来做亲子鉴定,其原理来自于盂德尔的遗传规律。DNA是人类遗传的基本载体,DNA遗传标记通过遗传终身不变。DNA存在于细胞核内的染色体上,人类为维持种族的延续,必须把他们的遗传信息(DNA)稳定地传递给下一代。每个人体细胞有23对(46条)成对的染色体,其分别来自父亲和母亲。夫妻之间各自提供的23条染色体,在受精后相互配对,构成了23对(46条)孩子的染色体,如此循环往复构成生命的延续。由于人体约有30亿个核苷酸构成整个染色体系统,而且在生殖细胞形成前的互换和组合是随机的,所以除同卵双胞胎以外,没有任何两个人具有完全相同的核苷酸序列,这就是人的遗传多态性。尽管遗传多态性的存在,但每一个人的染色体必然也只能来自其父母,这就是DNA亲子鉴定的理论基础。
目前,国内外进行亲子鉴定的方法有:
1. 血型检验,即血液中各种成分的遗传多态性标记检验。主要包括:人类白细胞抗原(HLA)分型、红细胞抗原分型、红细胞酶型及血清型。
2. DNA多态性检验。主要包括有DNA指纹分析技术和聚合酶链反应技术(PCR)。
3. 当前DNA亲子鉴定利用人类基因组中的短串联重复序列(STR)和PCR技术进行个体识别。应用的材料可以是血液、精液、组织。DNA的STR检测是其中技术含量最高且精确性、准确性最高的一种方法。除了用于亲子鉴定,也广泛用于其它的身份识别。
一般来说,人体的任何组织或分泌物都可以做。DNA样品收集主要采用收集口腔上皮细胞、毛发或少量静脉血或者末梢血。此外,我们也可进行精液或精液斑、男女排出物混合斑、烟蒂、组织、骨骼、胎儿之绒毛、羊水等特殊样本。
STRPCR微卫星分析及SSRPCR是一个概念吗
相同。STR=SHORT TANDEM REPEAT,SSR=SIMPLE SEQUENCE REPEAT,STR=SSR=MICROSATELLITE=微卫星。微卫星DNA的定义核心序列为1-9(通常认为2-6)个核苷酸,连续重复5次以上,但重复序列总长度一般在500bp之内的DNA序列。SSR的分类根据SSR核心序列排列方式的不同,可分为3种类型:完全型(perfect)。指核心序列以不间断的重复方式首尾相连构成的DNA。如:ATATATATATATATATATATATATATATATATAT不完全型(imperfect)。指在SSR的核心序列之间有3个以下的非重复碱基,但两端的连续重复核心序列重复数大于3 。如:ATATATATGGATATATATATCGATATATATATATATATGGATATATATAT复合型(compound) 。指2个或2个以上的串联核心序列由3个或3个以上的连续的非重复碱基分隔开,但这种连续性的核心序列重复数不少于5 。如:ATATATATATATATGGGATATATATATATA 3种类型中完全型是SSR标记中应用较多的一种类型。SSR在植物基因组中的分布 SSR广泛分布于各种真核生物的基因组中,大约每隔10~50kb就存在一个SSR。哺乳动物中的SSR的数量大约为植物中的5~6倍。在植物中,平均23.3kb就有一个SSR;双子叶植物中的SSR数量大于单子叶植物,前者两个SSR之间的平均间距为21.2kb,后者为64.6kb;核DNA中的SSR数量多于细胞质DNA中的SSR,绝大多数单碱基重复型及2碱基重复型SSR存在于非编码区,3碱基重复型多位于编码区。微卫星的利用价值由于核心序列重复数的不同,等位的SSR位点可呈现出多态性(SSLP,simple sequence length polymorphism)。大多表现为共显性遗传,有的表现为显性遗传。由于SSR DNA两侧序列(离开20bp以上)表现出保守特征,所以可设计出上下游PCR引物,扩增出包含SSR的DNA序列。微卫星分析常用于:遗传图谱构建;种质鉴定;遗传多样性分析;标记辅助选择(MAS,marker- assistant seletion,marker- aided seletion);基因定位;数量性状基因座(QTL)分析;系谱分析;亲源关系鉴定等。SSR引物的来源借鉴其他近缘种序列。通过筛选文库、测序开发自己的SSR引物。通过核酸数据库查询,从已有序列中搜寻包括SSR的序列并设计引物。SSR分析实验的主要技术环节提取DNA;PCR扩增;电泳及显色;电泳胶板带型的照相、记录;数据分析处理。其中,PCR产物分离的电泳方法主要有:高浓度琼脂糖电泳(4%胶只能分辨4-6bp差异);变性聚丙烯酰胺序列胶电泳;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。 由于扩增的片段短
(一般小于300bp),基因间的差异小
(一般为几个bp),故通常使用分辨率高的聚丙烯酰胺凝胶电泳。在程序上,变性胶虽然比非变性胶麻烦些,但考虑到在非变性胶上会出现人为假象—异源双链分子,比如导致SSR杂合子中出现3-4条带,而不是正常的2条带,从而干扰等位位点统计,因此我们建议在SSR分析中均采用变性胶电泳。PCR扩增产物显色方法有:同位素放射性自显影法;荧光染料标记法;溴化乙锭(EB)显色法;银染法(目前多用此法)。8D:D
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