目的 建立测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量的方法。方法 采用HPLC法，以甲醇作溶剂、摇床振荡（150 r/min）3 h提取洛伐他汀，色谱条件：以甲醇?18 mmol/L磷酸溶液（体积比为80∶20）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为237 nm。结果 洛伐他汀在5～50 g/ mL质量浓度范围内与峰面积线性关系良好，加样平均回收率为100.75%，RSD为0.87%。结论 本方法简便有效，重复性好，可作为红曲霉相关产品的质量控制方法。
Abstract:Objective To establish an HPLC method for determining the content of lovastatin in fermentation broth of Monascus. Method Lovastatin could be pletely extracted from the fermentation broth by methanol under shaking for 3 h with 150 r/min. Then, samples were analyzed on the HPLC column using methanol?18 mmol/L phasphate(80∶20) as mobile phase under the flow rate of 1.0 mL/min. The detection welength was 237 nm. Result The method had good linearity over the concentration of 5～50 g/mL for lovastatin. The erage recovery was 100.75% and RSD 0.87%.Conclusion The method is convenient, effective and accurate, which is suitable for the quality control of Monascus products.
Key words:HPLC; Monascus; lovastatin
红曲霉的应用在我国已有近两千年的历史，红曲霉的早期研究主要集中在其所产的红曲色素和各种酶类，如淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、果胶酶等，因此早期红曲霉主要用于食品着色、酿酒、食品发酵等［1,2］。1979年日本学者Endo［3］从红曲霉培养物中分离筛选出具有降脂作用活性成分Monacolin K(即洛伐他汀，lovastatin)，经临床验证为有效治疗胆固醇血症的高效低毒药物。国内外学者纷纷开展了红曲霉洛伐他汀发酵的研究，开发红曲系列保健食品。本文进行了HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀的研究，确定了最佳色谱条件和简便有效的样品预处理方法，为红曲霉相关产品的研究开发提供参考。
1 仪器与材料
1.1 仪器
Waters 2695/2996液相色谱仪（empower色谱工作站），primo R低温高速离心机（德国Sorvall公司），SHZ-82气浴恒温振荡器（江苏省金坛市宏华仪器厂），十万分之一电子天平（日本岛津）。
1.2 试剂与试药
洛伐他汀对照品（批号100600-200502，中国药品生物制品检定所），95%乙醇（分析纯，广州化学试剂厂），甲醇（分析纯，广州化学试剂厂），甲醇（色谱纯，英国TEDIA公司）。
1.3 菌株
安卡红曲霉（Monascus anka）CICC5031，由中国工业微生物菌种保藏中心保存。
2 菌株的培养
将菌株接种在含有马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）4.01%的平板培养基上培养5 d，以活化菌株，然后接种于含有质量分数分别为葡萄糖10%，牛肉浸膏0.5%，（NH4）2SO4 2.5%，番茄酱5%， CaCO3 1%， MgSO47H2O 1%，pH6.5的摇瓶培养基，30 ℃、150 r/min振荡培养。
3 方法与结果
3.1 色谱条件
色谱柱为Dikma Diamonsil C18(4.6 mm250 mm；5 m)；柱温30 ℃；检测波长237 nm；进样体积10 L，甲醇?18 mmol/L磷酸（体积比80∶20）为流动相，流速为1.0 mL/min。在该条件下，对照品与样品的色谱图见图1。
3.2 标准曲线的绘制
样品溶液的制备：取摇瓶培养10 d的发酵液2 mL,研磨后加入8 mL无水甲醇，150 r/min振荡3 h，5 000 r/min离心10 min后取上清，经0.22 m滤膜过滤后得到样品溶液。
对照品溶液的制备：准确称取洛伐他汀对照品10.0 mg，用无水甲醇定容至100 mL，经0.22 m滤膜过滤后得到100 g/mL对照品溶液。HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量论文
