高效液相色谱的原理及分析方法

[高效液相层析的方法]⑴液-固吸附层析：固定相是具有吸附活性的吸附剂，常用的有硅胶、氧化铝、高分子有机酸或聚酰胺凝胶等。液-固吸附层析中的流动相依其所起的作用不同，分为“底剂”和洗脱剂两类，底...+阅读

高效液相色谱的原理及分析方法

分析色谱图手动进样步骤配置好流动相，将滤嘴洗头放入流动相页面内，打开泵和检测器，快跑排除气泡，设置既定流速，稳定一段时间，让基线跑平，用液相针吸取称量融配脱气后的对照（含量已标定），打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中，拔出针头好立刻关闭六通阀，一般随六通阀关闭电脑自动采样，等主峰跑完整后记录其峰面积，一般跑两个对照，每个对照跑两针，共四针。然后开始注称好溶配脱气后的样，以对照主峰的保留时间来判断样品中目标峰的位置，外标法以峰面积计算供试品中某物质的含量。X=[S样*K/m样（1-水分）]*对照品含量%*100X：供试品的含量（%）；S样：供试品的主峰面积；K：单位面积对照品的质量m样（1-水分）：称取供试品折干后的质量（mg）;X对：对照品的含量（%）；（我是用仪器的，不是做广告的，推荐你去海川论坛的化工分析版块儿上去深入的学习，知识是积累起来的，不是一个问题一个答案这么简单，海川里说明还算比较丰富的，仪器信息网针对仪器本身有一些。

）仪器自身的原理请看参考资料URL（随手找的）

高效液相色谱方法及应用的目录

第一章绪论第一节高效液相色谱法的特点

一、与经典液相（柱）色谱法比较

二、与气相色谱法比较

三、高效液相色谱法的优点

四、高效液相色谱方法发展简介第二节高效液相色谱法的分类

一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类

二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类第三节高效液相色谱法的应用范围和局限性

一、应用范围

二、方法的局限性参考文献第二章高效液相色谱仪简介第一节流动相及储液罐

一、储液罐

二、流动相脱气第二节高压输液泵及梯度洗脱装置

一、高压输液泵

二、输液系统的辅助设备

三、梯度洗脱装置第三节进样装置

一、停流进样装置

二、六通阀进样装置

三、自动进样器第四节色谱柱

一、柱材料及规格

二、柱填料

三、保护柱

四、柱连接方式

五、柱温控制第五节检测器

一、检测器的分类和响应特性

二、紫外吸收检测器

三、折光指数检测器

四、电导检测器

五、荧光检测器

六、蒸发光散射检测器第六节色谱数据处理装置

一、微处理机

二、色谱工作站参考文献第三章液固色谱法和液液色谱法第一节分离原理

一、吸附系数

二、分配系数第二节固定相

一、液固色谱固定相

二、液液色谱固定相第三节流动相

一、表征溶剂特性的重要参数

二、液固和液液色谱的流动相第四节二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律

一、溶质保留值的基本方程式

二、液固色谱的保留值方程式

三、液液色谱的保留值方程式参考文献第四章键合相色谱法第一节分离原理

一、正相键合相色谱法的分离原理

二、反相键合相色谱法的分离原理第二节固定相

一、键合固定相的制备及分类

二、键合固定相的性质

三、使用键合固定相应注意的问题第三节流动相

一、溶剂的选择性分组

二、在键合相色谱中选择流动相的一般原则

三、改善色谱分离选择性的方法

四、多元混合溶剂的多重选择性

五、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律

六、用线性溶剂化自由能关系（LSER）来表征反相液相色谱中溶质的保留值方程式第四节新型高效液相色谱的固定相和流动相

一、新型高效化学键合固定相

二、化学键合固定相分类方法简介

三、整体色谱柱

四、超热水流动相第五节离子对色谱法

一、分离原理

二、固定相、流动相和对（反）离子

三、影响离子对色谱分离选择性的因素参考文献第五章梯度洗脱第一节基本原理

一、等度洗脱

二、梯度洗脱第二节影响梯度洗脱的各种因素

一、梯度洗脱时间（？t???G）对分离的影响

二、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围的影响

三、梯度陡度对保留值的影响

四、柱温变化对保留值的影响

五、梯度洗脱程序曲线形状的影响

六、影响梯度洗脱的其他变量第三节优化梯度洗脱的方法

一、建立梯度洗脱方法的一般步骤

二、梯度洗脱中的实验条件第四节梯度洗脱的图示方法

一、二元溶剂梯度洗脱

二、三元溶剂梯度洗脱

三、四元溶剂梯度洗脱

四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱参考文献第六章体积排阻色谱法第一节分离原理

一、分布系数

二、体积排阻色谱法的特点第二节固定相

一、固定相的分类

二、凝胶固定相的特性参数

三、凝胶色谱柱的制备及谱图特点第三节流动相

一、凝胶渗透色谱的流动相

二、凝胶过滤色谱的流动相第四节凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量分布

一、聚合物分子量、分子量分布及测定的意义

二、凝胶渗透色谱图的解析及数据处理参考文献第七章高效液相色谱法的基本理论第一节表征液相色谱柱填充性能的重要参数

一、总孔率

二、柱压力降

三、柱渗透率第二节高效液相色谱的速率理论

一、影响色谱峰形扩展的各种因素

二、范第姆特方程式的表达及图示第三节诺克斯方程式

一、描述色谱柱性能的折合参数

二、诺克斯方程式第四节色谱柱操作参数的优化

一、三个柱操作参数的表达式

二、HPLC中实用柱操作参数的优化

三、柱操作参数优化的图示表达方法第五节 “无限直径”效应和柱外效应

一、“无限直径”效应

二、柱外效应第六节超高效液相色谱

一、超高效液相色谱的理论基础

二、实现超高效液相色谱的必要条件

三、超高效液相色谱的应用参考文献第八章高效液相色谱分离条件的优化第一节高效液相色谱中色谱参数的相关性

一、色谱参数的分类

二、色谱参数的相关性第二节色谱分离条件优化标准的选择

一、难分离物质对的峰对分离优化标准

二、整体色谱图的优化标准第三节色谱响应函数和色谱优化函数

一、Morgan和Deming提出的色谱响应函数

二、Watson和Carr提出的色谱响应函数

三、Glajch和Kirkland提出的色谱优化函数

四、Berridge提出的色谱响应函数第四节色谱分离条件的优化方法

一、单纯形法

二、窗图法

三、混合液设计实验法

四、重叠分离度图法

五、等强度洗脱和梯度洗脱的优化图示法第五节优化HPLC分离的计算机辅助方法

一、实验设计系统

二、人工智能系统第六节高效液相色谱专家系统简介

一、专家系统的组成

二、专家系统的使用方法参考文献第九章微柱液相色谱法第一节方法简介

一、微型柱的分类

二、微柱液相色谱法的优点和缺点第二节基本理论

一、柱外效应

二、管壁效应

三、稀释效应

四、分离阻抗第三节仪器装置

一、输液...

如何建立好药物含量的高效液相色谱分析方法

1，首先必须去进行配制药物溶液前处理的工作。找出该药物的溶解性，探索出该药物的有效溶剂，使该药物能在该溶剂中充分溶解，这是药物溶液配制的前处理必然途径，也是进行高效液相色谱含量分析的首要条件。

2，然后就是根据该药物配制溶液的前处理方法，配制好适当浓度的药物溶液，利用该药物溶液，在紫外-可见分光光度计上进行紫外扫描，找到该药物的最大吸收波长，确立适合的高效液相色谱分析的检测波长。因为它是进行高效液相色谱含量分析的基本条件

3，再是色谱柱的选择：根据药物的极性来选择合适极性的色谱柱类型

4，再是流动相的确立。配制一系列的流动相，考察合适的流动相。

5，再是准确度考察。通过精密度、重复性和重现性的考察来衡量仪器的准确度

6，接着是线性关系考察。配制不同浓度的一系列溶液，进行其溶液的色谱扫描。根据所得的不同浓度下的药物峰面积作为纵坐标（Y轴）、以溶液浓度为横坐标（X轴）进行线性回归，得到其线性图，考察其线性程度，即线性相关系数R=？。考察的目的就是：为了我们在做含量分析时，选择一个合适的浓度进行检测，不至于你配制的待测溶液浓度范围不在线性范围之内，造成测量结果的错误。

7，再是最低检测浓度和检测限的考察。目的是为了考察这种方法的实用性，是否符合痕量分析的要求。

8，再是回收率考察。目的是考察方法的准确性。

9，再是稳定性考察。目的是考察试验方法的时间性，指导我们在分析检测时，建立合适的溶液配制到进样的时间段，保证实验结果的准确性。

10，最后是专属性考察。

HPLC是什么

高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）也叫高压液相色谱（high pressure liquid chromatography）、高速液相色谱（high speed liquid chromatography）、高分离度液相色谱（high resolution liquid chromatography）等。是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。