微生物与免疫学表面抗原实验报告

[医院微生物实验室安全管理自查报告]为加强医院病原微生物实验室生物安全管理工作，确保医院平安目标的实现，我院检验科根据xxxx省《病原微生物实验室生物安全管理条例》的相关内容，对医院实验室安全管理工作进行了...+阅读

微生物与免疫学表面抗原实验报告

细胞表面抗原检测实验

实验原理

用人结肠癌细胞为免疫原，免疫小鼠，制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原（Ag）的单克隆抗体 IgG（第一抗体），二者可以发生特异性的抗原抗体反应，形成抗原抗体复合物，再加入市售（也可自制）的荧光标记的羊抗鼠IgG抗体（第二抗体），可以与复合物进一步发生抗原抗体反应（二次抗体反应），这样就可以在光显微镜下观察到这种抗原在结肠癌细胞表面的存在。

实验材料

HeLa细胞

试剂/试剂盒

1640培养液小牛血清甲醛固定液 PBS 液体石蜡

仪器/耗材

盖片载片培养瓶培养皿滤纸镊子吸管倒置显微镜荧光显微镜微量加样器

实验步骤

1. 将培养瓶中的结肠癌细胞接种到装有盖片的培养皿中，培养2~3天。

2. 在倒置镜下观察到盖片上的细胞生长状态良好后，在盖片左上角用玻璃笔做一下标记，以免在以后的操作中正反面颠倒。

3. 将盖片放在甲醛固定液中，4℃固定5~10分钟。

4. 用PBS洗三次，注意不要将PBS液直接倒在盖片的细胞面，以免引起细胞大量丢失。用滤纸片将盖片上的PBS轻轻吸干，不要损伤细胞层。

5. 将已稀释好的小鼠抗体滴在盖片上.每个盖片50 μl,37℃温育30分钟。

6. 用PBS洗三次，滤纸吸干。

7. 将已稀释好的荧光标记羊抗鼠二次抗体5μl滴加在盖片上，37℃温育30分钟。

8. 用PBS洗三次，滤纸吸干。

9. 将载片上滴一滴液体石蜡。然后将盖片细胞面朝下放到载玻片上，在荧光显微镜下观察。

普通光学显微镜的使用及微生物观察实验报告怎么写

标本制作：

制作显微镜标本，分一下6大步骤，可以供初学者进行参考：

1.取载玻片与盖玻片各一片，用软布擦干净，由于盖拨片很薄，擦时要小心，可用左手拇指和食指夹住盖玻片边缘，把纱布平铺在右手手掌上，从上下两面轻轻夹住盖玻片，平均使用力量慢慢轻擦，这样才不会把盖玻片擦碎。

2.用滴管吸取1~2滴清水，放在载玻片中央。

3.用镊子撕取观察物体一小片（无论观察细胞组织或器官，材料必须做成薄片，才能观察，这些薄片不能过厚，一般一层细胞的厚度为好，如果过厚不但细胞互相重叠，而且光线不易穿透，虽然在显微镜下能勉强看到轮廓，但细致的结构很难看清），置于载玻片上的小水滴中，尽量勿使材料皱缩。

4.用镊子夹取一片干净的盖玻片，先以盖玻片的一边斜着与小水滴接触，然后便慢慢放下盖玻片，将观察材料全部盖上，操作时，防止盖玻片骤然下降，以免发生气泡，妨碍观察效果。

5.制作好的玻片，要盖玻片与载玻片之间恰好被水分充满；当水分不足时，可用滴管从盖玻片一侧的边缘滴少许水分，在另一侧用吸水纸吸，从而使盖玻片与载玻片之间被水分充满；当水分多余时，可用吸水纸吸去多余水分。

6、染色：用滴管从盖玻片一侧的边缘滴少许碘液，在另一侧用吸水纸吸，从而使盖玻片与载玻片之间被碘液充满；当碘液多余时，可用吸水纸吸去多余碘液。制作好后就可以放到显微镜下面观察了。

用显微镜观察曲霉酵母菌细菌的实验报告怎么写

答：酵母菌的观察与霉菌的观察

一、目的要

1、观察酵母菌、霉菌的个全形态以及它们之间的区别。

2、学会用水浸法观察酵母菌和霉菌的技术。

3、了解酵母菌和霉菌细胞的构造和繁殖方式的特点。

二、实验材料

1、接种针、接种杯、酒精杯、载玻片、盖玻片、吸管。

2、0.1%美蓝液、乳酸-石炭酸液（配方见附录）。

3、菌种啤酒酵母、假丝酵母、黑根霉、毛霉、青霉、木霉、曲霉。

三、方法步骤

（一）酵母菌的形态观察酵终菌是单细胞真核核微生物，细胞核和细胞质有明显分化，个体比细菌大得多，有的能形成假菌丝。繁殖方式较复杂，无性繁殖以出芽生殖为主，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。

1、酵母菌的形态与出芽生殖的观察在载片上滴一滴蒸馏水，以无菌操作，用接种环挑取少许啤酒酵母置于载片上蒸馏水中，取一块盖片，小心地将盖玻片一端与菌液接触，然后缓慢地将盖玻片放下；这样可避免产生气泡。先用低倍镜观察，再用高倍镜观察酵母细胞的形状、大小、构造、内含物及出芽方式。

2、子囊孢子的观察将啤酒酵母接种于麦芽汁液体培养中，于28-30℃培养24小时，连续传代3-4次，最后转接到培养子囊孢子的培养基上（也可用肉法蛋白胨培养基）。25-28℃培养3天左右，涂片染色（按芽孢染色法）观察子囊孢子开关和特点，并注意每一个子囊内的孢子数等。

3、假丝酵母观察用划线法将假丝酵母接种在麦芽汁平板上。在划线部分加盖玻于25-30℃培养3天先观察菌落边缘，再取下盖玻片，在显微镜下观察呈树枝状分枝的假菌丝细胞的形状，或将皿盖打开，直接将培养皿放在载物台上，在低倍镜下观察。

4、酵母菌菌落观察取啤酒酵母、假丝酵母、园酵母以三点点植法接种于麦芽汁平板上，于28-30℃坟3天。观察菌落表面、高度、边缘、质地和颜色等。

5、酵母菌死活的检查在载片上加一滴0.1%美蓝，把酵母培养液滴加在美蓝液上，加盖玻片观察，死细胞为兰色，活细胞无色。

（二）霉菌形态观察霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。在观察时要注意细胞的大小，菌丝构造和繁殖方式。菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性孢子是怎样着生在孢子梗上及有性孢子如何生成。由于霉菌菌丝较粗大，孢子很容易飞出，如果放在水中观察时容易收缩变形，所以在制标本时不用水，而用乳酸-石炭酸溶液，使细胞不致变形，并有杀菌作用。

1、取培养有青老、木霉、毛霉、曲霉的平皿，挑取一团菌丝，置于滴有一滴乳酸-石炭酸液的载片上，加盖玻片，由于霉菌是由菌丝组成的，许多菌丝交错在一起形成菌丝体。在高倍镜下观察菌丝分隔情况，分成孢子着生情况（要辨认分生孢子子梗、顶囊、小梗及分生孢子）。

2、取一培养有根霉的平皿观察假根、匍匐枝、孢子囊柄及孢子囊。注意假根着生情况。挑取少量菌丝，置于滴有一滴乳酸-石炭酸液的载玻上，加盖片。在高倍镜下观察孢子囊柄，孢子囊及子囊孢子。

3、取一培养好的各种老菌菌落的平皿，注意观察菌落形态，表面质地，颜色。