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三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量测定

12月07日 编辑 fanwen51.com

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摘要:目的,研究三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量。方法,采用HPLC法,以甲醇-水(65:35)为流动相,274nm为检测波长。结果,三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量:根茎叶花。

关键词:三花龙胆 龙胆苦苷 HPLC 含量测定

龙胆入药历史悠久,早在《神农本草经》中就有关于龙胆形态及性味的初步记载,列为中品。龙胆味苦,性寒,入肝、胃经,有泻肝胆实火,除下焦湿热的功效。三花龙胆是龙胆的来源之一,主要分布在黑龙江、吉林、辽宁等地。本文采用HPLC法测定了三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量,以便于合理的开发新的药用资源。

1 实验材料

1.1 仪器:Waters 515高效液相色谱仪(美国);SPD-10A紫外检测器;色谱柱(4.6mm250mm);10l进样器。

1.2 材料:龙胆苦苷对照品(中国药品生物制品检定所);三花龙胆购于哈尔滨市郊,经鉴定为龙胆科植物三花龙胆的干燥根、茎、叶及花;甲醇(色谱纯)。

2 含量测定

2.1 色谱条件:色谱柱Hypersil C18柱;流动相:甲醇-水(65:35);柱温:室温;流速:1ml/min;检测波长274nm。

2.2 标准曲线的绘制:精密称取龙胆苦苷对照品12.50mg,置10ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。分别取对照品溶液

2、

4、

6、

8、10l,测得各峰面积。以对照品进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,计算得回归方程:Y=1.38106X+6.9104,相关系数r=0.9996;结果表明龙胆苦胆在2.5~12.5g呈良好线性关系。

2.3 精密度试验:取同一对照品溶液,重复进样5次,每次10l,连续测定,峰面积RSD为1.31%。

2.4 稳定性试验:取同一对照品溶液,每20min进样一次,重复进样5次,峰面积的RSD为1.96%,表明在100min内基本稳定。

2.5 重复性试验:精密称取同一批号龙胆药材粉末0.5g(n=5),按样品液的制备操作,其含量的RSD为1.52%。

2.6 回收率试验:精密称取已知含量的样品0.5g(n=5),分别精密加入龙胆苦苷对照品1.80、1.90、2.00、2.

10、2.20(mg),按样品液的制备操作,测定,平均回收率为97.57%,RSD为1.81%。

2.7 样品的含量测定

2.7.1 样品液的制备:分别称取三花龙胆的不同部位根、茎、叶、花的干燥粉末(过4号筛)0.5g(同时另取本品粉末测定水分),精密称定,置于10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,置超声波清洗中超声提取40min,取出,摇匀,室温静置30min,过滤至10ml容量瓶中,滤渣用少量甲醇分数次洗涤,洗出液并入滤液中,最后加甲醇至刻度,摇匀。

2.7.2 含量测定:吸取上述根提取液1ml置于10ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度;茎、叶、花保持原浓度;分别将上述提取液微孔滤膜过滤,取10l进样,结果如表1。

表1 不同部位龙胆苦苷的含量

样品 含量(%)

三年生花1.03

三年生叶1.92

三年生茎3.16

三年生根12.38

3 讨论

3.1 试验表明采用高效液相法进行测试,方法简便、稳定性好、灵敏度高。

3.2 三花龙胆中龙胆苦苷的含量随着采收的月份不同而不同,而且不同的部位含量也不同,地下部分根及根茎中龙胆苦苷的含量较高,是主要成分部位。地上部分含量较低,总体上含量:根茎叶花。

3.3 在超声提取三花龙胆时,以超声震荡器高频震荡40min为最好,延长震荡时间,龙胆苦苷的含量未见增加,可见40min龙胆苦苷已提取完全。

参考文献

1 林克勤,与雪呤等.东北龙胆地上部分芒果苷定量测定[J].国土与自然资源研究,1994,94(3):79-80.

2 张建生,田子心等.九种龙胆中五种裂环烯醚萜苷类苦味成分的高效液相色谱定量分析[J].药学学报,1991,26(11):864-870.

3 宋万志.中国龙胆科药用植物概况[J].中药通报,1986:627.

4 高海,金惠敏等.龙胆药材中龙胆苦苷的HPLC法测定[J].西北药学杂志,1998,13(3):140.

三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量测定

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