腺苷钴胺片如何检查

[如何开展安全生产检查]安全生产检查是搞好安全生产工作的重要措施之一。通过检查，可以及时地发现施工生产中存在的事故隐患，及时要求责任方进行整改，消除事故隐患，避免和减少生产安全事故的发生。并可...+阅读

腺苷钴胺片如何检查

腺苷钴胺片羟钴胺素避光操作。取本品10片，除去糖衣，研细，用氯化钾溶液（取0.2mol/L氯化钾溶液250ml 与0.2mol/L盐酸溶液53ml，加水稀释至1000ml）分次转移至50ml量瓶中，振摇，使腺苷钴胺溶解，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）过滤，滤液照分光光度法，分别在460nm与352nm的波长处测定吸收度，二者的比值应不低于0.80。含量均匀度避光操作。取本品1片，除去糖衣，置10ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）适量，振摇使腺苷钴胺溶解，用磷酸盐缓冲液（pH7.0 ）稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm ）过滤，取续滤液照分光光度法在261nm的波长处测定吸收度。限度为±20%，应符合规定。其它应符合片剂项下有关的各项规定。

腺苷脱氨酶的方法说明

近十几年来，随着对ADA的深入研究，检测方法也不断发展。目前已发展了四代。第一代 ADA测试： ADA将腺苷（Adenosine）脱氨产生次黄苷（Inosine）和氨（NH3）。一个ADA活性单位在测试特定条件下每分钟脱氨1μmole腺苷成为次黄苷。通过动态测量腺苷265nm处吸光度下降的速度，可以测算ADA的活性大小。Kaplan法（1955）由此建立。由于高底物浓度造成吸光度过高，该法仅适用于腺苷浓度低于40μM。如此低的底物浓度达不到底物饱和要求，造成ADA活性检测失真。因此，该法不适用于临床应用。第二代 ADA测试：原理为腺苷脱氨酶催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤核苷和氨。然后用Berthelot显色反应（1859）测定反应过程中产生氨的量，从而计算血清ADA活性单位。所需试剂易配制，仪器简单，但灵敏度低，易受外源性NH3影响，空白过高，不能直接测定红细胞ADA活性。

同样原因，ADA偶联谷氨酸脱氢酶（Glutamate Dehydrogenase,GLDH）反应：通过测量340nm处NADPH吸光度下降的速度来测算ADA活性。该法也因血清含氨干扰，以及测试系统中过高NADPH造成非特异性氧化而无成算。第三代 ADA测试： Kalckar氏应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶（Purine nucleoside phosphorylase,PNP）和黄嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase,XOD）反应连续监测法。通过测量293nm处尿酸盐吸光度上升的速度来测算ADA活性。但是，293nm时血清吸光度太高，造成临床应用不便。第四代 ADA测试：通过ADA偶联PNP,XOD，过氧化氢酶（Catalase）和醛脱氢酶（Aldehyde dehydrogenase），借助过氧化氢（H2O2）反应测量334nm处NADPH吸光度上升的速率来测算ADA活性。该法克服了以往ADA测试的困难，然而，鉴于试剂成本高，阻碍实际临床使用。

最新对第四代测试方法的改进为偶联PNP,XOD和过氧化物酶（Peroxidase,POD）反应。ADA酶解腺苷（Adenosine）脱氨产生次黄苷（Inosine）；再通过PNP的作用，生成次黄嘌呤（Hypoxanthine）；后者在XOD氧化下生成尿酸（Uric Acid）和过氧化氢（H2O2）；最后在POD的作用下H2O2再与N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3-methylaniline (EHSPT)、4-氨基安替比林（4-aminoantipyrine,4-AA）反应（Trinder氏反应），生成紫红色的有色醌（Quinone dye）。通过动态测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。从反应原理可知NH4+对该法无影响。其原理反应方程式如下：反应具有测定精密度高，抗干扰能力强，适合自动化快速测定的特点，为临床常规开展ADA检测应用创造了有利条件。

ada的测试方法演变

近十几年来，随着对ADA的深入研究，检测方法也不断发展。目前已发展了四代。第一代ADA测试：ADA将腺苷（Adenosine）脱氨产生次黄苷（Inosine）和氨（NH3）。一个ADA活性单位在测试特定条件下每分钟脱氨1μmole腺苷成为次黄苷。通过动态测量腺苷265nm处吸光度下降的速度，可以测算ADA的活性大小。Kaplan法（1955）由此建立。由于高底物浓度造成吸光度过高，该法仅适用于腺苷浓度低于40μM。如此低的底物浓度达不到底物饱和要求，造成ADA活性检测失真。因此，该法不适用于临床应用。第二代ADA测试：原理为腺苷脱氨酶催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤核苷和氨。然后用Berthelot显色反应（1859）测定反应过程中产生氨的量，从而计算血清ADA活性单位。所需试剂易配制，仪器简单，但灵敏度低，易受外源性NH3影响，空白过高，不能直接测定红细胞ADA活性。

同样原因，ADA偶联谷氨酸脱氢酶（Glutamate Dehydrogenase, GLDH）反应：通过测量340nm处NADPH吸光度下降的速度来测算ADA活性。该法也因血清含氨干扰，以及测试系统中过高NADPH造成非特异性氧化而无成算。第三代ADA测试：Kalckar氏应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶（Purine nucleoside phosphorylase,PNP）和黄嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase, XOD）反应连续监测法。通过测量293nm处尿酸盐吸光度上升的速度来测算ADA活性。但是，293nm时血清吸光度太高，造成临床应用不便。第四代ADA测试：通过ADA偶联PNP,XOD，过氧化氢酶（Catalase）和醛脱氢酶（Aldehyde dehydrogenase），借助过氧化氢（H2O2）反应测量334nm处NADPH吸光度上升的速率来测算ADA活性。该法克服了以往ADA测试的困难，然而，鉴于试剂成本高，阻碍实际临床使用。

最新对第四代测试方法的改进为偶联PNP,XOD和过氧化物酶（Peroxidase, POD）反应。ADA酶解腺苷（Adenosine）脱氨产生次黄苷（Inosine）；再通过PNP的作用，生成次黄嘌呤（Hypoxanthine）；后者在XOD氧化下生成尿酸（Uric Acid）和过氧化氢（H2O2）；最后在POD的作用下H2O2再与N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3-methylaniline (EHSPT)、4-氨基安替比林（4-aminoantipyrine, 4-AA）反应（Trinder氏反应），生成紫红色的有色醌（Quinone dye）。通过动态测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。从反应原理可知NH4+对该法无影响。其原理反应方程式如下：反应具有测定精密度高，抗干扰能力强，适合自动化快速测定的特点，为临床常规开展ADA检测应用创造了有利条件。迈克腺苷脱氨酶（ADA）检测试剂盒性能指标检测方法：XOD-PAP法（第四代改良法），不与其它核苷反应，无NH4+影响，灵敏度高。

剂型：液体双试剂，直接使用，避免复溶引起瓶间差。线性范围：0~200U/L，γ2≥0.99准确度：不准确度正常水平≤15%，异常水平≤10%。稳定性：密闭避光贮存2~8℃可稳定12个月，开瓶上机2~8℃避光稳定30天。抗干扰能力：标本中胆红素≤342umol/L，血红蛋白≤200mg/dl，甘油三酯≤8.47mmol/L，抗坏血酸≤4mg/dl 及NH4+对本试剂测定无影响。适用性：适用于各种半/全自动生化分析仪。参考范围：4~22U/L(37℃)，建议各实验室建立自己的参考值范围。

小儿腺苷脱氨酶缺乏的检查方法是什么

实验室检查： ADA缺乏患儿红细胞，淋巴细胞或成纤维细胞ADA活性极低或缺乏。携带者红细胞ADA酶活性约为正常的一半。通过测定培养羊水成纤维细胞或绒毛膜活检ADA酶活性可作产前诊断。基因分析可了解基因突变位点和类型，并有助于家系调查。 1。红细胞中缺乏ADA 其含量只有正常红细胞的2%~4%，其他组织中的ADA活性下降到正常的10%~30%。利用羊膜穿刺术行ADA活性测定，有助于产前诊断。 2。外周血淋巴细胞明显减少少数病人嗜酸性粒细胞增高、血小板聚集功能差。 3。血液Ig水平低下尤以IgA和IgM缺乏明显，各种特异性抗体效价降低；细胞免疫功能显著降低，淋巴细胞的PHA转化、迟发型变态反应均阴性。其他辅助检查： X线检查可发现缺乏胸腺影，X线骨片检查可发现各种骨骼畸形；其他根据临床需要做X线胸片检查，可发现肺部病变；脑电图和脑CT检查可发现中枢神经系统病变等。